Cuidados y protocolos recomendados
Las columnas de HPLC son componentes críticos y a menudo costosos. Sin embargo, con unos cuidados básicos y protocolos adecuados, puedes duplicar o incluso triplicar su vida útil, manteniendo al mismo tiempo una calidad de análisis excelente.
En este artículo te explicamos cómo cuidar correctamente una columna de HPLC y qué rutinas adoptar para maximizar su rendimiento a largo plazo.
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Filtrar siempre muestras y disolventes
- Por qué es importante:
La presencia de partículas sólidas en las muestras o disolventes puede obstruir la columna, generar presiones elevadas y dañar la fase estacionaria. - Consejo práctico:
- Usa filtros de jeringa de 0,22 µm o 0,45 µm para todas las muestras.
- Filtra también las fases móviles y utiliza filtros de línea para proteger la bomba.
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Utilizar agua de alta pureza
- Por qué es importante:
Agua contaminada introduce iones, materia orgánica y microorganismos que degradan progresivamente la columna. - Consejo práctico:
Utiliza exclusivamente agua ultrapura Tipo I, con TOC bajo (<10 ppb).
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Evitar cambios bruscos de fase móvil
- Por qué es importante:
Cambios rápidos entre disolventes muy diferentes (por ejemplo, de 100% agua a 100% acetonitrilo) provocan tensiones mecánicas en la columna que reducen su vida útil. - Consejo práctico:
- Realiza transiciones graduales.
- Lava la columna con una mezcla intermedia antes de cambiar completamente de disolvente.
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Controlar el pH de trabajo
- Por qué es importante:
Los pHs extremos (por debajo de 2 o por encima de 8) pueden atacar el soporte de sílice de muchas columnas estándar. - Consejo práctico:
Trabaja preferentemente entre pH 3 y pH 7, a menos que la columna esté específicamente diseñada para condiciones extremas.
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Lavar la columna adecuadamente después del uso
- Por qué es importante:
Dejar compuestos fuertes o sales en la columna acelera su degradación. - Consejo práctico:
- Después de cada serie de análisis, lava con un disolvente fuerte (como acetonitrilo o metanol) durante 15-20 minutos.
- Si usas fases móviles con sales, realiza un lavado previo con agua para eliminar residuos iónicos.
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Almacenar la columna correctamente
- Por qué es importante:
Almacenar una columna de forma incorrecta puede permitir la precipitación de sales o el crecimiento bacteriano. - Consejo práctico:
- Para almacenamiento corto: dejar la columna en un disolvente intermedio (por ejemplo, 50% agua / 50% acetonitrilo).
- Para almacenamiento largo: en 100% disolvente orgánico compatible, y tapar firmemente ambos extremos.
Tabla resumen: cuidados esenciales para columnas de HPLC
| Cuidado | Beneficio |
| Filtrado de muestras y disolventes | Evitar obstrucciones y daños físicos |
| Uso de agua ultrapura | Evitar contaminación orgánica/inorgánica |
| Cambios graduales de fase móvil | Minimizar tensiones mecánicas |
| Control de pH | Proteger la estabilidad de la fase estacionaria |
| Lavado post-análisis | Eliminar contaminantes persistentes |
| Almacenamiento correcto | Evitar precipitación y contaminación bacteriana |
Conclusión
Un buen mantenimiento de las columnas de HPLC no solo protege tu inversión, sino que además garantiza resultados analíticos más fiables, reproducibles y consistentes.
En Advanced Chromatography, no solo suministramos columnas de HPLC de alta calida
te asesoramos para que las mantengas siempre en condiciones óptimas y prolongues su vida útil al máximo.
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